本帖最后由 花木男 于 2013-3-11 14:07 编辑
化学药剂诱导三角梅芽变试验方法
一、基本原理 化学药剂人工诱导三角梅芽变的原理是使用恰当的诱导药剂来处理三角梅的分生组织,使其产生多倍体。诱导药剂能在三角梅细胞分裂中期破坏纺锤丝的形成,使已经对等一分为二的染色体不能分向两极,同时阻止细胞分裂,造成原来的细胞体内染色体数目倍增,即形成了多倍体细胞(同源)。已知三角梅属二倍体植物,其染色体组n=17,二倍染色体2n=2x=34。化学诱导只能产生偶数多倍体,如染色体成为四倍体(2n=4x=68),或染色体为八倍体(2n=8x=136)。 二、多倍体形成的表现 三角梅的体细胞内染色体加倍后,细胞与之前的相比显著增大,可以明显的观察到新的组织和器官比正常的要大,并逐步展现出与母株正常的组织和器官完全不同的性状。这时,芽变的目的可能达到。 三、试验方法 本次实验采用滴液法,即用诱导药剂液滴直接处理芽孢,为防止药剂流失与挥发,使用少许脱脂棉将芽孢包裹,将药剂滴在脱脂棉上,然后套上透明塑料袋(见图1)。 四、试验植株的准备与操作 试验部位选择植株顶部或顶侧部的若干个芽孢。 根据植物分生组织学理论,植物顶端的细胞最活跃,因此,试验要选择植株顶端的芽来进行。 植株的修剪及芽孢的选择见图2与图3。 说明: 1、选择健壮的试验株,有条件的可每个品种选2~5株,用清水喷洗植株并浇透水,放置2~3天。 2、按图2所示进行修剪。选择顶部或顶侧部的、当年新发的枝条3~5支,每支留靠近主干部位的芽孢1~2个,剪去顶部过长的枝条和试验芽孢下面的几片叶子(剪刀事先用炉火烧烤灭菌),去除与试验无关的其它侧枝,然后将各个伤口涂上封口胶,防止植株体液挥发和细菌侵入。修剪后的效果如图3. 3、仔细观察实验植株,见顶枝芽孢可能要萌发(膨大)时,用少量脱脂棉将试验芽孢逐个包裹好,不能包得太紧,要方便以后松开而不伤害芽孢。 4、将诱导药剂软管上端的小盖打开,给每个试验芽孢的脱脂棉上滴上一滴诱导剂,一天两次,早晚各一次,不要多滴,然后盖好药剂瓶。 5、处理完毕后,将试验植株放置在阳光下。 6、试验最佳气温为25~30℃。试验期间植株应避雨水,也不能浇水与施肥。 7、连续重复操作6天后,用牙签或镊子小心挑去脱脂棉,然后用喷壶喷出的雾状水反复冲洗芽孢,以洗净药剂。喷洗时请将花盆放倒,使喷洗水不流进盆土里。 8、冲洗完毕后进行正常养护,每天仔细观察试验芽孢的变化,若发现试验芽孢与正常芽孢不同,则是见证奇迹的时候到了。 9、本次试验诱导剂为复合药剂,有3种编号,分为1#、2#与3#,每个编号的药剂浓度不同,每个试验者只能得到一个编号的药剂,目的是希望通过试验得出何种浓度的药剂的诱导效果更好。 10、特别提醒,本复合诱导药剂有一定的毒性,请将药剂瓶放置在小孩或宠物触及不到的安全处。使用时注意药液别触及皮肤,操作完毕后用肥皂将手洗净。试验完毕后请将剩余药剂倒入室外土壤中,药瓶丢弃前请用水洗净瓶内的残液。 五、试验的观察记录 参加者从选择试验植株开始就要进行试验记录(记录内容见以后的附表)与拍照,每天需观察试验株的变化,并将观察到的变化、其它情况和照片发至三版的本帖上,以便能了解到每个试验者的操作与进展状况,方便互相交流。 (请已确定参加者速将收件人姓名、地址和联系电话用本版短信告知我。)
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